Solução de coloração de violeta de cristal de oxalato de amônio é um componente da coloração de Gram. Na coloração de bactérias Gram-positivas, as células são coradas com violeta de cristal de oxalato de amônio e depois tratadas com solução de iodo Gram para formar um complexo insolúvel, que não pode passar pela parede celular e não é facilmente descolorizado, portanto permanece roxo. Após a coloração, as bactérias contrastam nítidas com o ambiente, e a morfologia, o arranjo e certas características estruturais das bactérias podem ser claramente observadas, que podem ser usadas para classificação e identificação. Etapas de operação (somente para referência): 1. Opere de acordo com os requisitos específicos do experimento 2. Esmague: pegue as bactérias a serem testadas, aplique uma camada fina no centro da lâmina de vidro ou solte um pouco de água estéril na lâmina de vidro, misture as bactérias e a água uniformemente e aplique uma camada fina. 3. Secagem: Após a mancha, deixe secar naturalmente à temperatura ambiente ou aquecê -lo levemente em uma lâmpada de álcool para secar rapidamente. 4. Fixação: Mantenha uma extremidade da lâmina de vidro com a amostra voltada para cima e mova -a rapidamente e para trás 3 a 5 vezes na parte externa da chama da lâmpada de álcool, cada vez por 1 s. Também pode ser corrigido com metanol ou etanol. 5. Tingimento inicial: Adicione a solução de coloração com violeta de cristal gota a canto por 1-2 minutos, enxágue com água para remover a solução de tingimento. 6. Mordant: Adicione a solução de iodo Gram gota a gota e cubra os slides por 1-2 minutos à temperatura ambiente e depois lave com água. 7. Descoloração: Dropwise Adicione a solução descolorante e agite por 10 a 30 anos, até que a solução descolorante que flui para baixo não pareça roxa, enxágue imediatamente a solução descolorante com água para encerrar a reação. 8. Contraestando: Adicione a solução de coloração amarela de areia gota a gota para o tingimento, 30 ~ 60s e lave com água. 9. Seque. Exame microscópico: Observe com espelho de óleo. Resultado de coloração: Bactérias gram-positivas: azul a roxo; Bactérias gram-negativas: vermelho. Precauções: 1. Antes de manchas, as marcas de círculo devem ser feitas na parte traseira para julgar a posição dos testes subsequentes. 2. Ao tomar bactérias, você deve prestar atenção à autoproteção. Ao remover ou conectar a rolha do tubo de ensaio, a boca do tubo de teste deve ser ligeiramente cauterizada pela chama e, finalmente, o anel de inoculação deve ser cauterizado na chama. Ao aquecer e fixar a mancha, deve -se notar que a lâmina de vidro não deve estar muito próxima da chama. Geralmente, a temperatura da lâmina de vidro não deve exceder 60 ° C. 3. A chave para a coloração de Gram é controlar estritamente o grau de descoloração, e o tempo de descoloração deve ser julgado de acordo com a experiência. Descoloração excessiva, bactérias positivas podem ser infectadas por engano como bactérias negativas; Descoloração insuficiente, bactérias negativas podem ser infectadas por engano como bactérias positivas. 4. O tempo de cultura das bactérias a serem testadas afetará a coloração. Se o tempo de cultura das bactérias positivas for muito longo ou as bactérias mortas são dissolvidas, é frequentemente negativo. 5. Para sua segurança e saúde, use um casaco de laboratório e luvas descartáveis.
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